1950年,摩根、莫顿和帕克描述了第一个完全定义的前言之一,它在很大水平上不依靠动物产物或提取物做为营养来源。该培育提拔基撑持原代鸡胚心脏细胞的生长。自那以后,它被称为培育提拔基199。
艾美捷M199 细胞培育提拔基目前的用处是在病毒和疫苗消费中添加血清,以及培育提拔许多非转化细胞。它也与不太复杂的介量连系利用。用厄尔平衡盐润色的培育提拔基199设想用于在情况(非CO2)大气前提下连结的细胞。M2852与原始配方的差别之处在于包罗所有L-氨基酸。原始配方含有10种DL氨基酸,以每克计,其生物活性低于响应的L-氨基酸。
觅觅一种替代血清的合成培育提拔基来庇护体外细胞的研究始于19世纪末,并不断继续至今。Ringer、Locks和Tyrode用添加了葡萄糖的心理盐水取代血清,从而为定义培育提拔基的开发奠基了根底。跟着生化和阐发手艺的改进,血清中的维生素、激素和氨基酸等更多成分已被判定并纳进心理盐溶液中,从而降低并在某些情状下消弭了做为介量填补所需的动物血清浓度。虽然在消费完全限制的培育提拔基方面临原始配方停止了许多修改,但盐溶液在组织培育提拔中仍然发扬着重要感化。盐溶液的根本功用是庇护培育提拔基中的pH值和渗入平衡,为细胞供给水和必须的无机离子,那在今天和一个世纪前初次开发时一样有价值。
厄尔平衡盐的抉择受以下因素的强烈影响:
1. 细胞类型,
2. 单层培育提拔的类型,悬浮液,克隆,以及
3. 化学定义的需要水平。回忆有关特定细胞系所需培育提拔基、填补物和心理参数的定见的文献很重要。
艾美捷M199 细胞培育提拔基每升阐明:
将9.4g化解在800-900ml ddH2O中,悄悄搅拌曲至完全化解。假设需要,添加0.35g碳酸氢钠。将培育提拔基的pH值调整至所需程度。添加额外的水,使溶液到达1L。利用0.22微米膜过滤器停止过滤消毒。等分到无菌容器中。不要高压釜。含有不不变的化合物,可能会因高压灭菌而损坏。
贮存和不变性:
在室温下贮存粉状介量。可不变12个月。翻开的瓶子应盖紧盖子,并连结在暗中、低湿度的情况中。预备好的培育提拔基应连结在4°C,并在短时间内利用。
注:仅供研究利用,不得用于人类、治疗或诊断利用。
艾美捷M199 细胞培育提拔基文献参考:
1. Morgan, J.F., Morton, H.J. and Parker, R.C. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 73:1-8 (1950). 2. Morgan, J.F., Campbell, E. and Morton, H.J. J.N.C.I. 16:2, 557-567 (1955)