办法/步调
1、预备好取水点所用三角瓶，经高温（250℃，0.5h）灭菌。
镊子经铝箔纸包拆后，经高温（250℃，0.5h）灭菌。
配造需求量的R2A培育提拔基和缓冲液（能够选用0.9%氯化钠溶液或pH7.0氯化钠卵白胨缓冲液），经高压蒸汽灭菌（121℃，15min）。
包拆好过滤安装，经高压蒸汽灭菌（121℃，15min）。假设不安心能够选用高压蒸汽灭菌（121℃，30min）。注：如许更平安一些，制止阴性比照长菌。
停止试验，起首将R2A培育提拔基倾倒在一次性培育提拔皿上，待凝聚，备用。
取1ml各取水点的水加进至事先称好的灭菌缓冲液（体积大小能够本身选用，因为是薄膜过滤法，溶液全数颠末滤膜，所以选用一个操做便利的体积即可）中，过滤。然后用100ml缓冲液冲刷滤膜3次。
7取出滤膜，平放在培育提拔基上，悄悄将气泡赶出。
注：一般一个取水点至少做2个皿。阴性比照可间接加进同体积的缓冲液，其余同步调6
纯化水是一种用于产物消费的原辅料及清洁用水，深入影响着产物的量量问题，纯化水微生物限度查抄是确保纯化水量量问题的重要环节之一，应根据《中国药典》2020年二版纯化水微生物限度查抄的要求，停止查抄，详细流程如下。
纯化水微生物限度查抄：第一步
菌液的造备：
取铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌工感化菌种挑取少量培育提拔物接种至10ml 胰酪大豆胨液体培育提拔基中，30~35℃培育提拔18~24小时。取该别致培育提拔液1ml加进至0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍梯度稀释至10-5~10-8，造成每1ml含菌数不大于100cfu的菌悬液。
纯化水微生物限度查抄：第二步
供试液的造备：
供试品：纯化水
冲刷液：pH7.0无菌氯化钠-卵白胨缓冲液
1）试验组：吸收1ml供试液注进滤杯中，用pH7.0无菌氯化钠-卵白胨缓冲液100ml停止过滤冲刷，别离在冲刷液中加进上述2种菌液各1ml过滤，滤干后，将薄膜用镊子夹到已凝聚的R2A琼脂培育提拔基上，平行造备2个平皿。在30~35℃培育提拔5天，看察成果，测定所加进的试验菌数。
2）供试品比照组：取供试液1ml，以稀释液取代菌液同试验组操做。每个样品各造备2个平皿。在30～35℃培育提拔5天，看察成果，测定供试品的菌数。
3）菌液比照组：取不含中和剂及灭活剂的响应稀释液替代供试液，按试验组操做加进试验菌液平行造备2个平皿。在30~35℃培育提拔5天，看察成果，测定其菌数。
4）稀释剂比照组：取100ml pH7.0无菌氯化钠-卵白胨缓冲液注进滤杯，加进上述2种菌液各1ml停止过滤，滤干后，将薄膜用镊子夹到已凝聚的R2A琼脂培育提拔基上。平行造备2个平皿。在30~35℃培育提拔5天，看察成果，测定其菌数。
微生物限度查抄仪
纯化水微生物限度查抄：第三步
试验成果阐发：
1）计数办法适用性试验停止3次独立平行试验(别离利用差别取样点的纯化水)，并别离计算各试验菌每次收受接管试验的比值，应在50%~200%范畴内。
2）试验组菌数收受接管率（%）=试验组的均匀菌数-供试品比照组的均匀菌数/菌液比照组的均匀菌数×100%
3）稀释剂比照组收受接管率（%）=稀释剂比照组的均匀菌数/菌液比照组的均匀菌数×100%
纯化水微生物限度查抄：第四步
误差处置情状：
验证的数据产生的任何误差，应及时停止误差查询拜访，根据《误差治理规程》停止处置并照实笔录，给出合理的误差处置办法，并上报验证指导小组，笔录存案，而且根据处置办法停止响应的处置，并对处置的过程、成果停止笔录与跟踪。
微生物查抄仪：/