【细胞解读系列】HEK293细胞系,您领会几呢?

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kanwenda
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近年来,用于重组卵白药物消费的次要细胞为哺乳动物细胞,因为它们具有类似人类细胞的糖基化润色体例,HEK293 衍生的细胞系凡是用于瞬时卵白量消费,已成为一种普遍应用于消费重组卵白的哺乳动物异源表达系统。

一、什么是HEK93

HEK293细胞,又叫人胚胎肾细胞293,是一个衍生自人胚胎肾细胞的细胞系,具有转染效率高,易于培育等特点。因而成为了广阔研究者研究基因功用的一个强大东西。

(HEK293图册)(HEK293图册)

二、HEK293细胞系概览

(注:以下细胞介绍中,HEK293细胞简称为293细胞)

293T细胞:293细胞直达入SV40T-antigen基因构成的高转衍生株,即为293T细胞系。那使得包罗SV40ori的量粒可以在该细胞系中显著扩增,从而促进表达载体的扩增,促进卵白的表达。293T细胞除了可用于各类基因表达及卵白消费,还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒消费,如腺病毒及其他哺乳动物病毒。

293T/17细胞:293T细胞中共转染入pBND 和 pZAP 量粒,获得的具有G418耐受的细胞系即为293T/17细胞系。该细胞系在保有293T细胞的优良性能之外,还具有高转染性的特点。

293H细胞:293H细胞则指的是将293细胞驯化后得到的可以在无血清培育系统下快速生长、具有高转染效率及高效卵白表达性能的细胞系。别的,该细胞系贴附力好,而被用于噬菌斑检测等应用。

293E细胞:293E细胞指的是在293-H细胞中插入EBNA-1基因的细胞系,该基因可以不变表达EBV病毒的EBNA1卵白。含有EBV复造起点(oriP)的重组表达量粒,可以在H293E细胞中复造,并实现卵白的高效表达。

293F细胞:293F细胞是一类可以在无血清中高表达卵白的野生型293细胞系。293FT细胞是在293F细胞系中插入pCMV- SPORT6-TAg.Neo量粒的转化细胞系,可以快速增殖,易转染,其可以用于慢病毒的消费。

293S细胞:293S细胞则指的被驯化成可以悬浮培育且可以耐受低钙离子培育前提的293细胞系。

293SGGD细胞:293SGGD细胞系则指的是在293SG转染pcDNA3.1-zeo-STendoT量粒的细胞系,其次要用于糖基化工程研究中。

(HEK293概述图)

三、HEK293细胞表达系统的优势

1) 转染效率高;

2) 2) 可悬浮培育用于大规模表达;

3) 表达卵白构造最接近其在人体内构象;

4) HEK293细胞在培育系统中可以快速增长,高密度培育。

5) HEK293细胞与神经元细胞一样,对外界微情况较为敏感,操纵那一特点,可用于药物发现及细胞毒性测试。

在HKE293细胞系培育的整个过程中,都需要对细胞停止浓度和活率检测,牛顿光学CytoCubeAuto全主动便携高通量细胞计数仪是一款基于图像法检测的细胞计数仪,具有优良的光路系统和图像识别系统,可以有效的区分细胞碎片与杂量的干扰,得到十分不变可靠的成果。

(CutoCubeAuto明场形式下对HEK293细胞圈出情况)(CutoCubeAuto台盼蓝形式下对HEK293细胞圈出情况)参考文献:Lin Y C, Boone M, Meuris L, et al. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations[J]. Nature communications, 2014, 5: 4767.文章所引用内容均来自收集,如有侵权请联络删除

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