Bradford法是什么?如何使用它进行蛋白质分离和纯化?

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猪脚
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Bradford法是一种用于测定蛋白质含量的常用方法。它利用染料结合蛋白质的原理,将蛋白质溶液与Bradford染料混合后,通过比较其吸光度和已知浓度的标准曲线,确定蛋白质的含量。该方法不仅简单易操作,而且具有灵敏度高、线性范围广、抗干扰能力强等特点。

Bradford法是什么?如何使用它进行蛋白质分离和纯化?

使用Bradford法进行蛋白质分离和纯化,首先需要将待分离的混合物进行初步分离,如通过SDS-PAGE电泳分离。然后将分离出来的蛋白质溶液与Bradford染料混合,并测定吸光度。可以将吸光度较高的部分收集起来进一步分离纯化。

但需要注意的是,Bradford法在测定含有还原剂、表面活性剂、高盐、高脂肪等试样时容易出现干扰,因此应当选择合适的蛋白质测定方法。

总之,Bradford法是一种广泛应用于蛋白质测定和分离纯化的方法,但需要谨慎选择测定条件以及合适的分离纯化方法。

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